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15921799099
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詳細介紹
| 品牌 | Sigma-Aldrich | CAS | 2508-19-2 |
|---|---|---|---|
| 分子式 | C?H?N?O?S | 分子量 | 293.17 |
| 貨號 | P2297 | 規格 | 10ML |
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥,綜合 |
一、 產品描述
• 中文命名：苦基磺酸 溶液
• 英文命名：Picrylsulfonic acid solution / 2,4,6-Trinitrobenzenesulfonic acid solution (TNBS)
• 貨號：P2297
• 產品品牌：Sigma-Aldrich
• 產品級別：BioReagent（生物級試劑，滿足高標準的生化實驗需求）
• 物質純度/濃度：5 % (w/v) 水溶液（即每100mL溶液中含有5g苦基磺酸）
• 物理形態：液態（常溫下為澄清至微渾濁的黃色液體）
• 經驗分子式：C?H?N?O?S
• 主要應用：專用于光譜法定量測定伯胺（Primary amines），同時也可作為親水改性劑及多肽合成中的氨基酸保護基修飾試劑。
二、 產品核心特點
1. 優秀的檢測靈敏度與特異性
苦基磺酸 溶液作為一種經典的胺類檢測探針，能夠與伯胺基團發生高效、特異的親核芳香取代反應。其反應產物在特定的紫外可見光區域（通常在340nm或420nm附近，取決于具體的緩沖體系和pH環境）具有強烈的吸收峰，從而實現對痕量伯胺物質的精準定量檢測。
2. 高品質生化級（BioReagent）標準
作為Sigma-Aldrich旗下的高等級生化試劑，該產品經過了嚴格的質量控制和純度篩選，確保極低的雜質干擾。其批次間穩定性高，能夠滿足從基礎教學實驗到前沿生命科學研究的各種嚴苛要求。
3. 預配制的即用型水溶液
苦基磺酸（TNBS）純品在干燥狀態下具有一定的爆炸危險性，且在水中的溶解度有限。本產品將其預先配制為5% (w/v) 的穩定水溶液，不僅極大地提升了實驗操作的安全性，還免去了實驗人員自行繁瑣配制的步驟，開瓶即可使用，顯著提高了實驗室的工作效率。
4. 廣泛的應用兼容性
除了作為經典的伯胺定量試劑外，由于其分子結構中含有強吸電子的硝基基團，使其苯環極易受到親核進攻，因此在有機合成、高分子材料改性（如作為親水改性劑接枝聚合物表面）以及免疫學動物模型構建（如TNBS誘導的結腸炎模型）中均有重要應用。
三、 儲存與運輸條件
• 短期儲存（日常）：建議在 2℃ 至 8℃ 的避光環境下密封儲存。在此條件下，產品可保持穩定至少五個月且分解率低于5%。
• 長期儲存：若需延長保存期限，建議分裝后置于 -20℃ 冷凍保存，可有效保持試劑的長期活性與穩定性。
• 避光要求：該試劑對光線較為敏感，見光易發生分解產生Picric acid等雜質，因此全程避光（如存放于棕色試劑瓶或用鋁箔紙包裹）對于維持其化學性質至關重要。
• 運輸條件：常溫運輸即可，但收到貨物后應立即按規定溫度儲存。
• 安全警示：雖然本品為穩定的水溶液，但仍屬于含能材料衍生物。嚴禁在開口容器中加熱至干，干燥后的殘留物具有高的爆炸性。所有使用過的容器和廢棄物必須按照危險化學品的處理規范進行專門處置。
四、 工作原理與反應機制
苦基磺酸（TNBS）在定量分析伯胺（如氨基酸、多肽、蛋白質中的N端α-氨基或賴氨酸殘基的ε-氨基）時，其核心工作機制基于 親核芳香取代反應（Nucleophilic Aromatic Substitution, S_N2）。
1. 反應觸發：在弱堿性（通常pH 8.0 - 9.0）的緩沖體系中，伯胺（R-NH?）分子中的氮原子由于帶有孤對電子，表現出強烈的親核性。
2. 親核進攻：伯胺基團向TNBS分子中電子云密度較低的苯環碳原子（通常是連接磺酸基的對位）發起親核進攻，形成一個帶負電荷的 Meisenheimer 絡合物（σ-絡合物）中間體。
3. 離去基團脫離：隨著反應的進行，作為優良離去基團的磺酸根（SO??）從苯環上脫落。
4. 產物生成：最終生成穩定的、呈橘黃色的 TNP-胺
該有色衍生物在 340 nm（酸性條件）或 420 nm（堿性條件）波長處具有最大的光吸收值。根據朗伯-比爾定律（Lambert-Beer Law），通過測定反應體系在特定波長下的吸光度（OD值），即可計算出未知樣品中伯胺基團的準確濃度。
五、 解決實驗中的哪些痛點與問題
在生命科學與分析化學的日常實驗中，研究人員經常面臨以下難題，而本產品能夠提供解決方案：
1. 蛋白質/多肽濃度的快速準確定量
傳統的Lowry法或BCA法在含有高濃度去垢劑（如SDS、Triton X-100）或還原劑（如DTT、β-巰基乙醇）的樣品中會受到嚴重干擾，導致讀數偏差極大。而TNBS法則對這類干擾物質具有強的耐受性，能夠在復雜的裂解液或純化緩沖體系中依然保持對蛋白質伯胺基的精準檢測。
2. 氨基酸組成分析中的N端測定
在多肽測序或氨基酸分析儀的前處理中，需要明確樣品中游離α-氨基的數量。TNBS可以與除了脯氨以外的所有氨基酸發生反應，是進行氨基酸定性和定量分析的經典手段。
3. 高分子材料的表面親水化改性
對于某些本身疏水的聚合物基質，研究人員可以利用TNBS分子上的磺酸基或經過衍生化后的活性位點，將其接枝到材料表面，從而顯著改善材料的親水性能和生物相容性。
4. 免疫學炎癥模型的誘導
在動物實驗（特別是小鼠結腸炎研究）中，TNBS常被用作半抗原（Hapten）。當其與組織蛋白結合后，能夠將自身轉化為抗原，從而誘發宿主產生遲發型超敏反應，模擬人類炎癥性腸病（IBD）的病理過程。
六、 實驗使用方法與操作流程
為了獲得最佳且可重復的實驗結果，建議參考以下基于經典文獻優化的操作步驟進行伯胺濃度的測定：
A. 標準曲線繪制與樣品測定（以96孔板為例）
1. 試劑平衡：從冰箱（2-8℃）中取出本品，置于室溫下避光平衡30分鐘。同時準備好pH 8.5的硼酸鹽緩沖液（0.1 M）作為反應介質。
2. 制備標準品梯度：使用已知濃度的伯胺標準品（如甘氨或牛血清白蛋白 BSA），在緩沖液中稀釋出一系列濃度梯度（例如 0, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 mM）。
3. 加入TNBS試劑：向每個孔中加入等體積（如100 µL）的平衡后TNBS溶液，輕柔振蕩混勻。此時溶液應呈現均勻的黃色。
4. 避光孵育：蓋上多孔板蓋，在室溫（約25℃）下避光孵育 2 小時，或在 37℃ 下避光孵育 1 小時。注意：溫度過高可能導致試劑分解，需嚴格控制。
5. 終止反應與測定：根據需要，可加入稀酸或特定終止液中止反應。隨后將多孔板放入酶標儀中，在 420 nm（或340 nm，視具體緩沖體系而定）波長下測定各孔的吸光度值（OD???）。
6. 數據處理：以標準品的濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制標準曲線。根據樣品的吸光度值，即可從標準曲線上精確查得樣品中的伯胺濃度。
B. 多肽/蛋白質N端修飾操作
1. 將目標多肽溶解于適量的緩沖液（pH 8.5）中。
2. 按多肽物質的量 5-10 倍的比例加入本品。
3. 在室溫下避光攪拌反應 2-4 小時。
4. 反應結束后，可通過凝膠過濾色譜（GFC）或透析的方法去除未反應的TNBS小分子及副產物，收集改性后的多肽產物。
七、 常見問題分析與解決方案（FAQ）
在使用本品的過程中，可能會遇到一些技術疑問，以下是針對常見問題的專業解答與排查思路：
• 問題1：溶液底部或瓶壁出現了少量黃色或無色晶體，是否還能繼續使用？
• 原因分析：這可能是由于儲存溫度過低導致部分溶質析出，或是試劑輕微分解產生了微量的晶體。
• 解決方案：一般情況下，這些晶體不會影響產品的核心使用性能。建議將試劑瓶取出，置于室溫下充分平衡并輕輕搖晃直至晶體全重新溶解。若需高精度，可通過0.22 µm水系濾膜過濾后使用。
• 問題2：實驗測得的吸光度值偏低或不穩定，可能的原因是什么？
• 原因分析：可能是pH值不適宜導致反應不全；或是樣品中存在高濃度的還原性物質消耗了TNBS；亦或是孵育時間不足、光線過強導致產物分解。
• 解決方案：務必使用pH 8.0-9.0的緩沖體系；確保反應在嚴格避光的條件下進行；適當延長避光孵育時間至過夜；檢查樣品中是否含有干擾性強的還原劑。
• 問題3：產物的特征吸收峰除了420nm，還有沒有其他選擇？
• 原因分析：TNP-胺衍生物的紫外吸收受環境pH影響顯著。
• 解決方案：在酸性環境（pH < 5.0）下，最大吸收峰會藍移至 340 nm 左右，而在強堿性環境（pH > 10.0）下，則會紅移至 460 nm 左右。可根據實驗室儀器的配置靈活調整測定波長。
• 問題4：廢棄的TNBS溶液應當如何處理？
• 解決方案：切勿直接倒入下水道。應先用大量水稀釋，然后加入過量的溶液并緩慢加熱煮沸，使其分解為無毒的化合物后再行丟棄，或交由具有資質的危廢處理機構處置。
關鍵詞：Sigma-Aldrich、西格瑪奧德里奇、Sigma試劑、苦基磺酸、TNBS、P2297、伯胺測定試劑盒、生化試劑、多肽合成試劑、氨基酸分析、蛋白質定量、免疫學試劑、結腸炎模型、親水改性劑、生命科學試劑、分析純試劑、實驗室耗材、試劑、高性能生化試劑、產品說明書。
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（注：本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）
?Sigma-Aldrich熱賣產品
貨號 | 品名 | 規格 | 品牌 |
I0516-5ML | Insulin solution from bovine pancreas | 5mL | Sigma-Aldrich |
H0888-1G | Hydrocortisone | 1g | Sigma-Aldrich |
P2297-10ML | Picrylsulfonic acid solution | 10mL | Sigma-Aldrich |
F5881-10X10ML | 弗氏佐劑 | 10 X 10 ML | Sigma-Aldrich |
F5881-10ML | Freund’s Adjuvant, Complete | 10mL | Sigma-Aldrich |
MAB1285FX | Anti-HLA-B27 Antibody, clone HLA.ABC.m3, FITC conjugated | 100 assays | Sigma-Aldrich |
B2064-100G | Bovine Serum Albumin | 100g | Sigma-Aldrich |
33429-100MG-R | Doxycycline hyclate | 100mg | Sigma-Aldrich |
F8687-500ML | 澳洲胎牛血清, 熱滅活 | 500ML | Sigma-Aldrich |
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10109169001 | RNaseA（RNASEA-RO） | 100mg/瓶 | Sigma-Aldrich |
48914-U | ProClin™ 300 | 400ml | Sigma-Aldrich |
10771-100ml | Histopaque®-1077 | 100ml | Sigma-Aldrich |
239216-25mg | 碳酸鈣 | 25mg | Sigma-Aldrich |
U5128-1KG | 尿素 | 1 kg | Sigma-Aldrich |
243159-1G | (R)-3-羥基丁酸甲酯 | 1g | Sigma-Aldrich |
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M3633-250MG | 4-Methylumbelliferyl β-D-glucopyranoside | 250mg | Sigma-Aldrich |
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610014-1EA | 漏斗架 10mm Filter Supports | 100/pk | Sigma-Aldrich |
17000-25G | 溴乙酸 ReagentPlus®, ≥99.0％ | 25G | Sigma-Aldrich |
T2577 | Temozolomide | 25MG | Sigma-Aldrich |
42966-1KG | Kolliphor® HS 15 | 1 KG | Sigma-Aldrich |
D4693 | 蛋白酶II | 1g | Sigma-Aldrich |
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47036-50G-F | 皂素 | 50g | Sigma-Aldrich |
I9030-100ML | 2-Propanol | 100ml | Sigma-Aldrich |
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77938-100MG | 3-羥基己酸甲酯 | 100mg | Sigma-Aldrich |
PHR1359-500MG | Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material | 500MG | Sigma-Aldrich |
10417-5G-F | 8-苯基-1-萘磺酸 銨鹽 | 5G | Sigma-Aldrich |
A9165 | N-Acetylcysteine | 5g | Sigma-Aldrich |
p4543-10g | 丙戊酸 鹽 | 10g | Sigma-Aldrich |
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H7017-20MG | 血藍蛋白 來源于大鎖孔帽貝 （透孔螺） | 20MG | Sigma-Aldrich |
10103578001 | 膠原酶A | 100MG | Sigma-Aldrich |
H6635-50mg | Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime | 50mg | Sigma-Aldrich |
N0636 | Nicotinamide | 100g | Sigma-Aldrich |
L1886-25G | 亮綠 SF（淡黃） | 25G | Sigma-Aldrich |
T8787-100ml | Triton™ X-100 | 100ml | Sigma-Aldrich |
383694-100ml | 聚丁二烯 | 100ml | Sigma-Aldrich |
181374-100G | 聚丁二烯，順式 | 100 G | Sigma-Aldrich |
V900863-100G | 明膠（來源于豬皮膚） | 100g | Sigma-Aldrich |
M1787-10X1ml | 溶液 | 10X1ml | Sigma-Aldrich |
HT110116-500ML | Eosin Y 醇溶液 | 500ML | Sigma-Aldrich |
05-844 | Anti-PLK1 Antibody, clone 35-206 | ea | Sigma-Aldrich |
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A9771-50mg | Albumin–fluorescein isothiocyanate conjugate | 50mg | Sigma-Aldrich |
A5006-100G | L-精氨 | 100g | Sigma-Aldrich |
F9252-500ML | Folin & Ciocalteu’s phenol reagen | 500ML | Sigma-Aldrich |
461091-250G | 4-硝基苯甲酸 | 250G | Sigma-Aldrich |
S1888-1kg | 蔗糖 | 1kg | Sigma-Aldrich |
Z742914-1.8kg | 去污劑 ALCONOX(R) DETERGENT | 1.8kg | Sigma-Aldrich |
U5507-1MG | U5507-1MG | 1 MG | Sigma-Aldrich |
T-037-1ML | Testosterone, 1.0 mg/mL | 1ml | Sigma-Aldrich |
172502-100G | 硫代乙酰胺 | 100 G | Sigma-Aldrich |
274135-100ML | N,N-二甲基丙烯酰胺 | 100ml | Sigma-Aldrich |
A8887-1KG | 丙烯酰胺 | 1kg | Sigma-Aldrich |
252859-100G | Tris Base | 100g | Sigma-Aldrich |
A6283-100ML | 乙酸 | 100ml | Sigma-Aldrich |
P4170 | 碘化丙啶 | 1g | Sigma-Aldrich |
SML1596-5MG | PPZ2，≥98% (HPLC) | 5mg | Sigma-Aldrich |
RU5500 | Rabies Detection Reagent - Direct Fluorescence Assay | 5 mL | Sigma-Aldrich |
G3272-1kG | 鹽酸胍 鹽酸鹽 | 1kG | Sigma-Aldrich |
C1988 | Cycloheximide | 1g | Sigma-Aldrich |
A1009-1G | Albumin methylated from bovine serum | 1g | Sigma-Aldrich |
N2752-1G | 4-硝基苯棕櫚酸酯 | 1g | Sigma-Aldrich |
S5921-.1MG | Staurosporine from Streptomyces sp | 0.1 mg | Sigma-Aldrich |
F1804-50UG | 單克隆抗-FLAG® M2 小鼠抗 | 50ug | Sigma-Aldrich |
G6642-.2ML | 抗 谷氨 兔抗 | 0.2 mL | Sigma-Aldrich |
T2376 | L-甲狀腺素 | 100mg | Sigma-Aldrich |
C8052-0.5mg | 實驗試劑 | 0.5mg | Sigma-Aldrich |
G1393 | Gelatin solution | 100mL | Sigma-Aldrich |
A4262-2mg | Actinomycin D | 2mg | Sigma-Aldrich |
MAK008-1KT | Hydroxyproline Assay Kit | 1 kit | Sigma-Aldrich |
I9278-5ML | Insulin solution human | 5ML | Sigma-Aldrich |
P5147-100MG | 蛋白酶 來源于灰色鏈霉菌 | 100mg | Sigma-Aldrich |
661740-1G | 聚(乙烯基膦酸) | 1G | Sigma-Aldrich |
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