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    胰島素 溶液 來源于牛胰腺

    簡要描述:胰島素 溶液 來源于牛胰腺已用于:
    -研究外源胰島素對發(fā)育期肉牛血漿葡萄糖、胰島素、胰島素樣生長因子 I(IGF-I)和孕酮(P4)濃度的影響
    -利用原代人滋養(yǎng)層細(xì)胞和胎盤絨毛外植體研究妊娠并發(fā)癥期間胎盤的胰島素反應(yīng)性
    -研究胰島素受體信號通路對新生小鼠海馬神經(jīng)元樹突棘密度的影響

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):代理商
    • 更新時間:2026-04-22
    • 訪  問  量:2898

    詳細(xì)介紹

    品牌Sigma-Aldrich貨號I0516
    規(guī)格5ML供貨周期現(xiàn)貨
    應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合

    一、 產(chǎn)品詳細(xì)描述

    • 產(chǎn)品品牌:Sigma-Aldrich

    • 產(chǎn)品貨號:I0516

    • 英文全名:Bovine insulin, Cell culture grade insulin

    • 中文全名:胰島素 溶液 來源于牛胰腺

    • 核心成分與濃度:本品為預(yù)配制的濃縮溶液,胰島素濃度為 10 mg/mL。這意味著您拿到手的每一瓶試劑都含有高密度的活性因子,便于在無菌環(huán)境下直接吸取添加,避免了自行稱量溶解帶來的誤差與污染風(fēng)險。

    • 溶劑體系:胰島素溶解于 25 mM HEPES緩沖液中,并將 pH 值精確穩(wěn)定在 8.2。HEPES 是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)良緩沖劑,它能有效維持培養(yǎng)體系的酸堿平衡,抵抗由于細(xì)胞代謝產(chǎn)生的乳酸等酸性物質(zhì)帶來的 pH 波動。pH 8.2 的微堿性環(huán)境不僅有利于保持胰島素的空間構(gòu)象穩(wěn)定,還能在加入偏酸性的培養(yǎng)基后,迅速中和并達(dá)到細(xì)胞最適宜的 pH 7.2-7.4 區(qū)間。

    • 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn):本品經(jīng)過專門的內(nèi)毒素測試(Endotoxin tested)。高內(nèi)毒素會引發(fā)細(xì)胞的炎癥反應(yīng)、生長抑制甚至死亡,而 I0516 的低內(nèi)毒素特性使其滿足對無菌和無熱源要求高的哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)及單細(xì)胞分析實驗。

    • 物理形態(tài)與外觀:常溫(ambient)下為液體狀態(tài),通常為無色至淡黃色透明溶液。

    • 包裝與規(guī)格:常見的標(biāo)準(zhǔn)包裝為 5 mL(即含有 50 mg 總胰島素)或 25 mL(即含有 250 mg 總胰島素),采用防紫外線、密封性佳的無菌玻璃瓶封裝,確保運輸和長期保存過程中的活性不受損。


    二、 產(chǎn)品核心特點解析

    1. 天然來源與高度保守的生物活性

       胰島素 溶液 來源于牛胰腺提取自牛胰腺(Bovine pancreas)。在分子結(jié)構(gòu)上,牛源胰島素與人的胰島素序列具有高度同源性(僅存在三個氨基酸的差異),這使得它在進(jìn)入人體或哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境后,能夠極低免疫原性地被細(xì)胞識別并利用。更重要的是,相較于重組表達(dá)的胰島素,天然提取的牛胰島素在折疊結(jié)構(gòu)和二聚體/六聚體形成上更貼近生理狀態(tài),這賦予了它高的生物活性。即使在極低的濃度下,它也能高效地與細(xì)胞表面的胰島素受體結(jié)合,觸發(fā)下游的生長信號 cascade。

    2. 細(xì)胞培養(yǎng)級別的致純度

       產(chǎn)品中特別標(biāo)注了“Cell culture grade"(細(xì)胞培養(yǎng)級)。在試劑生產(chǎn)中,不同級別的純度對應(yīng)著不同的應(yīng)用場景。分析純(AR)或化學(xué)純(CP)的胰島素可能含有對細(xì)胞有毒害作用的重金屬離子或有機(jī)溶劑殘留,絕對不能用于活細(xì)胞培養(yǎng)。而 I0516 經(jīng)過多重純化步驟,去除了對細(xì)胞有害的雜質(zhì),確保其純度滿足甚至超越哺乳動物細(xì)胞長期傳代培養(yǎng)的需求。無論是嬌貴的原代神經(jīng)元細(xì)胞,還是快速分裂的腫瘤細(xì)胞系,都能在這款高純度胰島素的滋養(yǎng)下茁壯成長。

    3. 科學(xué)優(yōu)化的 HEPES 緩沖液配方

       正如前文所述,本品采用 25 mM HEPES 緩沖液(pH 8.2)作為溶劑。這一配方是經(jīng)過無數(shù)次實驗優(yōu)化得出的“黃金比例"。首先,HEPES 的 pKa 值(7.55)非常接近哺乳動物細(xì)胞的生理 pH 值(7.4),因此它能在細(xì)胞培養(yǎng)箱中(5% CO2 環(huán)境)提供比緩沖體系更穩(wěn)定的 pH 環(huán)境。其次,將母液 pH 設(shè)定為 8.2,是為了抵消在開瓶操作時二氧化碳逃逸導(dǎo)致的溶液堿性升高(即“碳酸漂移"效應(yīng)),從而保證添加到培養(yǎng)基中的胰島素始終處于最佳溶解和活性狀態(tài)。

    4. 嚴(yán)苛的內(nèi)毒素與無菌質(zhì)控

       細(xì)菌內(nèi)毒素(Endotoxin)是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖成分,即使是極微量的內(nèi)毒素也會對哺乳動物細(xì)胞產(chǎn)生強烈的毒性,導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯、基因表達(dá)異常甚至死亡。Sigma-Aldrich 對 I0516 實施了嚴(yán)格的內(nèi)毒素檢測,確保每一批次產(chǎn)品的內(nèi)毒素水平都控制在細(xì)胞可耐受的安全閾值之內(nèi)。此外,產(chǎn)品經(jīng)過 0.22 μm 濾膜無菌過濾,并灌裝在無菌環(huán)境中,直接消除了外源微生物污染的隱患,為高要求的單細(xì)胞測序、流式細(xì)胞術(shù)分析等前沿實驗提供了堅實的保障。


    三、 儲存與運輸條件指南

    • 未開封狀態(tài)(運輸與長期保存)

      本品在運輸過程中允許處于常溫(Ambient,通常指 15°C 至 30°C)環(huán)境。但在收到產(chǎn)品后,若短期內(nèi)(如一周內(nèi))不打算使用,強烈建議立即置于 2-8°C 的冰箱中冷藏保存。低溫環(huán)境能夠顯著降低胰島素分子的降解速率,延長其有效期。請注意,切勿將未開封的試劑直接放入 -20°C 或更低溫度的冷凍室,因為急劇的低溫可能會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或緩沖液結(jié)晶,從而破壞胰島素的活性構(gòu)象。

    • 已開封狀態(tài)(日常使用與保存)

      一旦您刺破了橡膠塞,引入了外界空氣和潛在的水分,產(chǎn)品的保存條件就需要更加謹(jǐn)慎。每次無菌吸取所需體積后,應(yīng)立即蓋緊瓶蓋,用封口膜(Parafilm)纏繞瓶口以防水分揮發(fā),并依然存放在 2-8°C 的冷藏環(huán)境中。在這樣的條件下,通常建議在 1-2 個月內(nèi)使用完畢,以保證最佳的促細(xì)胞生長效果。

    • 工作液的配制與分裝(避免反復(fù)凍融)

      如果您需要將 I0516 稀釋成更低濃度的日常工作液(例如 1 mg/mL 或 0.1 mg/mL),建議使用無菌的 PBS 或培養(yǎng)基本身進(jìn)行稀釋。特別需要注意的是,配制好的工作液絕對不能進(jìn)行反復(fù)凍融。蛋白質(zhì)的每一次冷凍和融化過程,都會伴隨著冰晶的形成和再溶解,這種物理脅迫會導(dǎo)致胰島素多肽鏈的斷裂和聚集,使其失去生物活性。因此,對于大包裝的試劑,我們強烈建議您在使用時,根據(jù)單次實驗的用量,將其分裝到多個無菌 EP 管中,每次僅取出一支融解使用。

    • 光照與震蕩控制

      胰島素作為一種蛋白質(zhì)激素,對紫外線和劇烈的物理震蕩非常敏感。無論是母液還是工作液,都應(yīng)避免長時間暴露在強光下,尤其是在熒光燈或紫外燈照射的超凈工作臺內(nèi)操作時,應(yīng)盡量縮短時間。同時,嚴(yán)禁使用渦旋振蕩器(Vortex)來混合胰島素溶液,劇烈的分子間碰撞會破壞其氫鍵和二硫鍵。如果需要混勻,請采用輕柔的倒置混勻或低速離心機(jī)短暫離心混勻的方式。


    四、 胰島素在細(xì)胞培養(yǎng)中的工作原理

    1. 與胰島素/IGF-1 受體的特異性結(jié)合

       哺乳動物細(xì)胞的細(xì)胞膜上廣泛分布著胰島素受體(Insulin Receptor, IR)和胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1R)。Sigma-Aldrich I0516 提供的牛源胰島素,能夠以高親和力與這些受體結(jié)合。值得注意的是,在體外細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中,胰島素的作用濃度(通常在 0.1 到 10 μg/mL 之間)遠(yuǎn)高于體內(nèi)生理濃度(約 0.5 ng/mL)。這種高濃度并非浪費,而是因為在體外環(huán)境下,胰島素除了作用于 IR,還能交叉結(jié)合并激活 IGF-1R。IR 和 IGF-1R 的激活,是啟動細(xì)胞內(nèi)生長程序的“第一把鑰匙"。

    2. 激活 PI3K/Akt 通路:促進(jìn)存活與蛋白質(zhì)合成

       當(dāng)胰島素與受體結(jié)合后,受體的酪氨激酶結(jié)構(gòu)域被激活,進(jìn)而磷酸化下游的胰島素受體底物(IRS)蛋白。IRS 蛋白隨后招募并激活磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K),PI3K 催化生成 PIP3,從而將 Akt(蛋白激酶 B)募集到細(xì)胞膜上并使其激活。激活的 Akt 就像是細(xì)胞的“生命天使",它通過磷酸化多種底物,一方面抑制糖原合酶激酶-3(GSK-3),從而促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成與細(xì)胞周期的進(jìn)展;另一方面,Akt 能夠抑制 BAD 等促凋亡蛋白的活性,關(guān)閉細(xì)胞的“程序",極大地提高細(xì)胞在體外惡劣環(huán)境下的存活率。

    3. 激活 MAPK/ERK 通路:驅(qū)動細(xì)胞周期與增殖

       除了 PI3K/Akt 通路,胰島素信號還能通過激活 Ras 蛋白,一路向下傳遞至絲裂原活化蛋白激酶(MAPK,或稱 ERK)。MAPK/ERK 通路是調(diào)控細(xì)胞有絲分裂的核心樞紐。它的激活能夠促進(jìn)細(xì)胞從 G1 期進(jìn)入 S 期,加速 DNA 復(fù)制,從而引發(fā)細(xì)胞的快速分裂與增殖。這對于需要大量擴(kuò)增細(xì)胞(如疫苗生產(chǎn)中的 Vero 細(xì)胞、CAR-T 療法中的 T 細(xì)胞)的實驗至關(guān)重要。

    4. 調(diào)控物質(zhì)代謝:葡萄糖攝取與脂質(zhì)合成

       胰島素經(jīng)典的功能是調(diào)節(jié)糖脂代謝。它能夠促使細(xì)胞膜上的葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(如 GLUT4)向細(xì)胞膜遷移,從而成倍增加細(xì)胞對培養(yǎng)液中葡萄糖的攝取效率。葡萄糖不僅是細(xì)胞呼吸的底物,更是合成核苷糖和氨基酸的前體。同時,胰島素還能激活乙酰輔酶 羧化酶(ACC),促進(jìn)脂肪酸的合成,為 rapidly dividing cells 提供充足的細(xì)胞膜構(gòu)建原料。

    綜上所述,Sigma-Aldrich I0516 實際上是向培養(yǎng)體系注入了一套完整的“生長指令"。它通過多靶點、多通路的協(xié)同作用,將原本可能處于休眠或應(yīng)激狀態(tài)的細(xì)胞,推向活躍的增殖與代謝軌道。


    五、 本品解決的實驗痛點與實際應(yīng)用

    1. 痛點一:原代細(xì)胞與干細(xì)胞的“水土不服"

       與永生化細(xì)胞系(如 HeLa、HEK293)不同,原代細(xì)胞(如原代肝細(xì)胞、神經(jīng)元、心肌細(xì)胞)和干細(xì)胞(如胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞)脫離了體內(nèi)的微環(huán)境后,往往表現(xiàn)出極差的適應(yīng)能力。它們不僅生長緩慢,而且極易發(fā)生凋亡或自發(fā)分化。

       解決方案:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加 1-5 μg/mL 的 I0516,可以極大模擬體內(nèi)的營養(yǎng)供給環(huán)境。胰島素提供的強效抗凋亡信號能夠顯著提高原代細(xì)胞的貼壁率和存活率。同時,通過精確控制胰島素的濃度,研究人員還可以在誘導(dǎo)干細(xì)胞分化時發(fā)揮關(guān)鍵作用(例如在高糖環(huán)境下誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞分化)。

    2. 痛點二:無血清/化學(xué)限定培養(yǎng)基(Serum-Free/Defined Media)的培養(yǎng)失敗

       胎牛血清(FBS)雖然是傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)補充劑,但其成分極其復(fù)雜且批次間差異巨大,容易引入外源病毒或朊病毒污染,嚴(yán)重影響實驗的可重復(fù)性,更不符合生物制藥(如單克隆抗體生產(chǎn)、重組蛋白表達(dá))的質(zhì)控要求。然而,直接撤除血清往往會導(dǎo)致細(xì)胞生長停滯。

       解決方案:I0516 是構(gòu)建無血清培養(yǎng)基的“四大金剛"(胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒、乙醇胺,即 ITSE 添加劑)之一。使用高純度、低內(nèi)毒素的 Sigma-Aldrich I0516 替代血清中的天然胰島素,能夠為細(xì)胞提供確定的生長刺激信號,同時保證培養(yǎng)基成分的可控和可追溯,是生物制藥上游工藝開發(fā)的理想選擇。

    3. 痛點三:細(xì)胞在傳代或凍存復(fù)蘇后的“恢復(fù)期"過長

       細(xì)胞在經(jīng)過酶消化(傳代)或液氮凍存復(fù)蘇后,細(xì)胞膜受到一定程度的損傷,處于高度應(yīng)激狀態(tài),此時它們的代謝水平極低,通常需要 24-48 小時才能恢復(fù)正常的分裂狀態(tài)。

       解決方案:在細(xì)胞傳代或復(fù)蘇后的第一天,在新鮮培養(yǎng)基中加入 5-10 μg/mL 的 I0516“急救包"。高濃度的胰島素能夠迅速激活 PI3K/Akt 通路,加速細(xì)胞膜的修復(fù),促進(jìn)受損細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的攝取,從而將恢復(fù)期縮短至 12 小時左右,大幅提高實驗效率。

    4. 痛點四:懸浮細(xì)胞的聚團(tuán)與死亡

       某些特定的細(xì)胞系(如雜交瘤細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞 Sf9)在大規(guī)模生物反應(yīng)器中培養(yǎng)時,容易因為營養(yǎng)攝取不均或機(jī)械攪拌應(yīng)力而發(fā)生細(xì)胞破裂和死亡。

       解決方案:持續(xù)在低濃度(0.1-1 μg/mL)的 I0516 存在下培養(yǎng)懸浮細(xì)胞,可以增強細(xì)胞膜的穩(wěn)定性,提高細(xì)胞對抗機(jī)械剪切力的能力。同時,胰島素促進(jìn)的葡萄糖攝取能夠為懸浮細(xì)胞提供足夠的能量,維持其在高密度下的活力。


    六、 詳細(xì)使用方法與實操指南

    第一步:準(zhǔn)備工作臺與試劑

    在超凈工作臺(層流罩)內(nèi)進(jìn)行操作,確保工作環(huán)境無菌。準(zhǔn)備好需要添加胰島素的培養(yǎng)基、無菌的移液器吸頭以及 15 mL 或 50 mL 無菌離心管。將冷藏保存的 I0516 母液取出,置于室溫下平衡幾分鐘(注意避光)。

    第二步:計算所需體積

    I0516 母液的濃度為 10 mg/mL(即 10,000 μg/mL)。假設(shè)您的培養(yǎng)基總體積為 V mL,目標(biāo)終濃度為 C μg/mL,則需要吸取的母液體積 Volume (μL) = (C * V) / 10。

    舉例說明:如果您有 500 mL 培養(yǎng)基,希望終濃度為 5 μg/mL,則所需母液體積 = (5  500) / 10 = 250 μL。*

    第三步:直接添加與混勻

    由于 I0516 是預(yù)過濾的無菌溶液,您可以直接用無菌吸頭吸取 calculated volume,加入到裝有培養(yǎng)基的容器中。隨后,采用輕柔的手腕搖晃或使用磁力攪拌器(低速)將培養(yǎng)基混合均勻。切記:不可使用渦旋振蕩器劇烈震蕩。

    第四步:分裝與保存(針對大體積配制)

    如果您一次性配制了大量含胰島素的培養(yǎng)基,建議將其分裝到無菌的試劑瓶中,存放在 4°C 冰箱。分裝可以避免頻繁開啟主儲存瓶導(dǎo)致的污染和反復(fù)溫度變化。

    不同細(xì)胞類型的推薦起始濃度:

    • 常規(guī)哺乳動物細(xì)胞系(如 CHO, HEK293, Hela):0.1 - 1 μg/mL。在此低濃度下即可滿足基本的促存活和促代謝需求。

    • 原代細(xì)胞及嬌貴細(xì)胞(如神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞):1 - 5 μg/mL。較高的濃度有助于抵抗原代提取帶來的應(yīng)激損傷。

    • 干細(xì)胞(ESC, MSC)及誘導(dǎo)分化實驗:0.1 - 10 μg/mL(視具體分化階段而定)。例如在脂肪分化誘導(dǎo)液中,通常需要 1-10 μg/mL 的高濃度胰島素來激活脂質(zhì)合成通路。

    • 昆蟲細(xì)胞(Sf9, High Five):1 - 5 μg/mL。有助于提高重組蛋白的表達(dá)產(chǎn)量。

    注:由于不同細(xì)胞系對胰島素的敏感性差異巨大,初次使用時建議設(shè)置 0.1、1、5、10 μg/mL 的濃度梯度實驗,通過 MTT/CCK-8 檢測細(xì)胞活力,確定對該細(xì)胞優(yōu)的添加量。


    七、 常見問題與專家級解決方案

    問題 1:從冰箱取出 I0516 后,發(fā)現(xiàn)瓶內(nèi)有少量白色絮狀沉淀或晶體,還能繼續(xù)使用嗎?

    • 原因分析:胰島素在 pH 值發(fā)生改變、溫度過高或反復(fù)凍融的情況下,容易發(fā)生聚集或變性析出。此外,HEPES 緩沖液在低溫下也可能析出微小晶體。

    • 解決方案:首先,不要劇烈震蕩。將其置于 25°C 室溫下靜置 15-30 分鐘,觀察沉淀是否重新溶解。如果澄清,則可以正常使用;如果沉淀無法溶解,或出現(xiàn)渾濁、顏色變深(如變?yōu)榉奂t色或棕色),則說明蛋白質(zhì)已變性或被污染,絕對不能再用于細(xì)胞培養(yǎng),必須廢棄處理。

    問題 2:添加了 I0516 的培養(yǎng)基,在使用前需要再次過濾除菌嗎?

    • 原因分析:使用者擔(dān)心二次污染或母液中的溶劑影響。

    • 解決方案:不需要。I0516 本身是無菌過濾的,只要您在超凈工作臺內(nèi)按照無菌規(guī)范操作吸取,直接添加到已滅菌的培養(yǎng)基中是安全的。反而,如果將配好的含胰島素培養(yǎng)基通過 0.22 μm 濾器進(jìn)行抽濾,由于胰島素分子量較大且容易在疏水膜上吸附,會導(dǎo)致實際進(jìn)入培養(yǎng)基的胰島素濃度大幅下降,造成實驗失敗。

    問題 3:我的細(xì)胞在添加了胰島素后,反而大面積漂浮死亡,是什么原因?

    • 原因分析:這通常是“過猶不及"或伴隨污染的表現(xiàn)。雖然胰島素是促生存因子,但如果濃度過高(遠(yuǎn)超細(xì)胞承受閾值),可能會過度激活某些反饋抑制機(jī)制。另一種可能是胰島素溶液在吸取過程中被真菌或細(xì)菌污染,污染物在培養(yǎng)箱中迅速繁殖并釋放毒素殺死細(xì)胞。

    • 解決方案:首先檢查污染可能性(取一滴培養(yǎng)基在顯微鏡下看是否有游動的細(xì)菌或菌絲)。如果排除污染,則降低胰島素的添加濃度(例如從 10 μg/mL 降至 1 μg/mL 重新開始測試)。

    問題 4:I0516 中的 HEPES 緩沖液會對我的細(xì)胞產(chǎn)生毒性嗎?

    • 原因分析:使用者對 HEPES 的耐受濃度存在疑慮。

    • 解決方案:不會。25 mM HEPES 是細(xì)胞培養(yǎng)中極為標(biāo)準(zhǔn)的緩沖液濃度(很多市售培養(yǎng)基本身就含有 15-25 mM HEPES)。這個濃度對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和干細(xì)胞都是安全且有益的,能有效防止培養(yǎng)液在開放式培養(yǎng)時 pH 值升高過快。

    問題 5:進(jìn)行 Western Blot 或 qPCR 實驗時,添加的胰島素會干擾我的檢測結(jié)果嗎?

    • 原因分析:擔(dān)心外源蛋白影響靶蛋白的定量。

    • 解決方案:不會干擾。在提取細(xì)胞蛋白或 RNA 時,我們會使用 PBS 多次洗滌細(xì)胞,這會將培養(yǎng)液中的胰島素洗去。即使有極微量殘留,在裂解細(xì)胞并煮沸上樣 buffer 后,胰島素也會變性破碎,不可能在 Western Blot 中與您的目的蛋白抗體發(fā)生交叉反應(yīng)。在 qPCR 中,微量的胰島素(不含核酸)也不會影響反轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增效率。

    問題 6:這瓶 I0516 開封后能在 4℃ 放多久?瓶身上沒有寫明開封后的保質(zhì)期。

    • 原因分析:追求試劑使用的絕對安全性。

    • 解決方案:雖然沒有硬性規(guī)定,但基于蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的一般規(guī)律,我們強烈建議在開封后 3 個月內(nèi)用完。每次抽取時務(wù)必保證吸頭無菌,使用后立即放回 4℃ 并用封口膜密封。如果發(fā)現(xiàn)溶液變得稍微粘稠或發(fā)黃,說明可能已經(jīng)滋生微生物或發(fā)生嚴(yán)重降解,請果斷丟棄。

    問題 7:我可以將 I0516 與其他生長因子(如 FGF、EGF)混合保存在同一管中嗎?

    • 原因分析:試圖簡化操作,提前配制復(fù)合生長因子工作液。

    • 解決方案:不建議這樣做。不同的生長因子最適保存 pH 值和離子強度不同。胰島素在微堿性(pH 8.2)下穩(wěn)定,而有些因子可能在中性或微酸性下更好。混合保存容易導(dǎo)致彼此的活性喪失。做法是:每次換液時,分別吸取所需的 I0516 和其他因子母液,直接加入到培養(yǎng)基中現(xiàn)配現(xiàn)用。

    問題 8:做單細(xì)胞測序(Single Cell RNA-Seq)建庫時,能用這款 I0516 嗎?

    • 原因分析:單細(xì)胞實驗對試劑純凈度要求高,怕內(nèi)毒素影響基因表達(dá)譜。

    • 解決方案:可以,而且非常推薦。產(chǎn)品描述中明確標(biāo)注了本品適用于“single cell analysis"(單細(xì)胞分析)并且經(jīng)過了嚴(yán)格的內(nèi)毒素測試。低內(nèi)毒素環(huán)境對于保持細(xì)胞在捕獲前的原始轉(zhuǎn)錄狀態(tài)至關(guān)重要,使用 I0516 可以有效避免因試劑污染導(dǎo)致的基因表達(dá)假陽性或細(xì)胞應(yīng)激死亡。


    關(guān)鍵詞:Sigma-Aldrich胰島素、牛胰腺胰島素溶液、細(xì)胞培養(yǎng)級胰島素、I0516說明書、無血清培養(yǎng)基添加劑、細(xì)胞生長因子、胰島素作用機(jī)制、細(xì)胞傳代復(fù)蘇、原代細(xì)胞培養(yǎng)、單細(xì)胞測序試劑、低內(nèi)毒素胰島素、HEPES緩沖液、哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞凋亡抑制劑、胰島素儲存條件、Sigma試劑采購、細(xì)胞培養(yǎng)攻略、生物制藥上游試劑、細(xì)胞代謝調(diào)控


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    ?Sigma-Aldrich熱賣產(chǎn)品

    貨號

    品名

    規(guī)格

    品牌

    I0516-5ML

    Insulin solution from bovine pancreas

    5mL

    Sigma-Aldrich

    H0888-1G

    Hydrocortisone

    1g

    Sigma-Aldrich

    P2297-10ML

    Picrylsulfonic acid solution

    10mL

    Sigma-Aldrich

    F5881-10X10ML

    弗氏佐劑

    10 X 10 ML

    Sigma-Aldrich

    F5881-10ML

    Freund’s Adjuvant, Complete

    10mL

    Sigma-Aldrich

    MAB1285FX

    Anti-HLA-B27 Antibody, clone HLA.ABC.m3, FITC conjugated

    100 assays

    Sigma-Aldrich

    B2064-100G

    Bovine Serum Albumin

    100g

    Sigma-Aldrich

    33429-100MG-R

    Doxycycline hyclate

    100mg

    Sigma-Aldrich

    F8687-500ML

    澳洲胎牛血清, 熱滅活

    500ML

    Sigma-Aldrich

    C-141-1ML

    Cannabigerol solution

    1mL

    Sigma-Aldrich

    10109169001

    RNaseA(RNASEA-RO)

    100mg/瓶

    Sigma-Aldrich

    48914-U

    ProClin™ 300

    400ml

    Sigma-Aldrich

    10771-100ml

    Histopaque®-1077

    100ml

    Sigma-Aldrich

    239216-25mg

    碳酸鈣

    25mg

    Sigma-Aldrich

    U5128-1KG

    尿素

    1 kg

    Sigma-Aldrich

    243159-1G

    (R)-3-羥基丁酸甲酯

    1g

    Sigma-Aldrich

    M4287

    Mitomycin C

    2mg

    Sigma-Aldrich

    RECOMT-1KT

    凝血 CleanCleave™ 試劑盒

    1 kit

    Sigma-Aldrich

    M3633-250MG

    4-Methylumbelliferyl β-D-glucopyranoside

    250mg

    Sigma-Aldrich

    G9145

    [Leu15]-Gastrin I human

    0.5mg

    Sigma-Aldrich

    T5648-1G

    泰莫西芬

    1G

    Sigma-Aldrich

    P8340-5ML

    Protease Inhibitor Cocktail

    5ml

    Sigma-Aldrich

    152633

    橄欖醇

    1g

    Sigma-Aldrich

    G7641-1MG

    Monosialoganglioside GM1 from bovine brain

    1mg

    Sigma-Aldrich

    P5493-1L

    磷酸鹽緩沖鹽水

    1L

    Sigma-Aldrich

    R8758-500ml

    1640培養(yǎng)基

    500ml

    Sigma-Aldrich

    H7379-1G

    血紅蛋白

    1g

    Sigma-Aldrich

    610000-1EA

    擠出器套件,帶支架/加熱塊

    1 ea

    Sigma-Aldrich

    91077C-100MG

    重組胰島素

    100mg

    Sigma-Aldrich

    C8654

    酪蛋白酸鈉

    500g

    Sigma-Aldrich

    MR-070-D

    EmbryoMax® Human Tubal Fluid (HTF) (1X), liquid, for Mouse IVF

    50mL

    Sigma-Aldrich

    H9268-5G

    Hexadimethrine bromide

    5g

    Sigma-Aldrich

    E1250-25MG

    Elastase from porcine pancreas

    25mg

    Sigma-Aldrich

    H4522-20ML

    Human Serum

    20mL

    Sigma-Aldrich

    T8154-100ml

    臺盼藍(lán)溶液 0.4%

    100ml

    Sigma-Aldrich

    C-142-1ML

    Cannabigerolic acid solution

    1ml

    Sigma-Aldrich

    610014-1EA

    漏斗架 10mm Filter Supports

    100/pk

    Sigma-Aldrich

    17000-25G

    溴乙酸 ReagentPlus®, ≥99.0%

    25G

    Sigma-Aldrich

    T2577

    Temozolomide

    25MG

    Sigma-Aldrich

    42966-1KG

    Kolliphor® HS 15

    1 KG

    Sigma-Aldrich

    D4693

    蛋白酶II

    1g

    Sigma-Aldrich

    P5899-5MG

    -L-賴氨酸 氫溴酸鹽

    5MG

    Sigma-Aldrich

    363502-10G

    Poly[(R)-3-hydroxybutyric acid]

    10g

    Sigma-Aldrich

    47036-50G-F

    皂素

    50g

    Sigma-Aldrich

    I9030-100ML

    2-Propanol

    100ml

    Sigma-Aldrich

    T9281-25ML

    四甲基乙二胺

    25ml

    Sigma-Aldrich

    A3678-25G

    過硫酸銨

    25g

    Sigma-Aldrich

    C3755-500UN

    肌酸磷酸激酶 來源于兔肌肉

    500units

    Sigma-Aldrich

    G8877-10MG

    鳥苷5′-三磷酸 鹽 水合物

    10mg

    Sigma-Aldrich

    77938-100MG

    3-羥基己酸甲酯

    100mg

    Sigma-Aldrich

    PHR1359-500MG

    Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material

    500MG

    Sigma-Aldrich

    10417-5G-F

    8-苯基-1-萘磺酸 銨鹽

    5G

    Sigma-Aldrich

    A9165

    N-Acetylcysteine

    5g

    Sigma-Aldrich

    p4543-10g

    丙戊酸

    10g

    Sigma-Aldrich

    SML1195-50MG

    Palonosetron 鹽酸鹽

    50MG

    Sigma-Aldrich

    H7017-20MG

    血藍(lán)蛋白 來源于大鎖孔帽貝 (透孔螺)

    20MG

    Sigma-Aldrich

    10103578001

    膠原酶A

    100MG

    Sigma-Aldrich

    H6635-50mg

    Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime

    50mg

    Sigma-Aldrich

    N0636

    Nicotinamide

    100g

    Sigma-Aldrich

    L1886-25G

    亮綠 SF(淡黃)

    25G

    Sigma-Aldrich

    T8787-100ml

    Triton™ X-100

    100ml

    Sigma-Aldrich

    383694-100ml

    聚丁二烯

    100ml

    Sigma-Aldrich

    181374-100G

    聚丁二烯,順式

    100 G

    Sigma-Aldrich

    V900863-100G

    明膠(來源于豬皮膚)

    100g

    Sigma-Aldrich

    M1787-10X1ml

    溶液

    10X1ml

    Sigma-Aldrich

    HT110116-500ML

    Eosin Y 醇溶液

    500ML

    Sigma-Aldrich

    05-844

    Anti-PLK1 Antibody, clone 35-206

    ea

    Sigma-Aldrich

    SRP3201-20UG

    GM-CSF 來源于小鼠

    20ug

    Sigma-Aldrich

    A9771-50mg

    Albumin–fluorescein isothiocyanate conjugate

    50mg

    Sigma-Aldrich

    A5006-100G

    L-精氨

    100g

    Sigma-Aldrich

    F9252-500ML

    Folin & Ciocalteu’s phenol reagen

    500ML

    Sigma-Aldrich

    461091-250G

    4-硝基苯甲酸

    250G

    Sigma-Aldrich

    S1888-1kg

    蔗糖

    1kg

    Sigma-Aldrich

    Z742914-1.8kg

    去污劑 ALCONOX(R) DETERGENT

    1.8kg

    Sigma-Aldrich

    U5507-1MG

    U5507-1MG

    1 MG

    Sigma-Aldrich

    T-037-1ML

    Testosterone, 1.0 mg/mL

    1ml

    Sigma-Aldrich

    172502-100G

    硫代乙酰胺

    100 G

    Sigma-Aldrich

    274135-100ML

    N,N-二甲基丙烯酰胺

    100ml

    Sigma-Aldrich

    A8887-1KG

    丙烯酰胺

    1kg

    Sigma-Aldrich

    252859-100G

    Tris Base

    100g

    Sigma-Aldrich

    A6283-100ML

    乙酸

    100ml

    Sigma-Aldrich

    P4170

    碘化丙啶

    1g

    Sigma-Aldrich

    SML1596-5MG

    PPZ2,≥98% (HPLC)

    5mg

    Sigma-Aldrich

    RU5500

    Rabies Detection Reagent - Direct Fluorescence Assay

    5 mL

    Sigma-Aldrich

    G3272-1kG

    鹽酸胍 鹽酸鹽

    1kG

    Sigma-Aldrich

    C1988

    Cycloheximide

    1g

    Sigma-Aldrich

    A1009-1G

    Albumin methylated from bovine serum

    1g

    Sigma-Aldrich

    N2752-1G

    4-硝基苯棕櫚酸酯

    1g

    Sigma-Aldrich

    S5921-.1MG

    Staurosporine from Streptomyces sp

    0.1 mg

    Sigma-Aldrich

    F1804-50UG

    單克隆抗-FLAG® M2 小鼠抗

    50ug

    Sigma-Aldrich

    G6642-.2ML

    谷氨 兔抗

    0.2 mL

    Sigma-Aldrich

    T2376

    L-甲狀腺素

    100mg

    Sigma-Aldrich

    C8052-0.5mg

    實驗試劑

    0.5mg

    Sigma-Aldrich

    G1393

    Gelatin solution

    100mL

    Sigma-Aldrich

    A4262-2mg

    Actinomycin D

    2mg

    Sigma-Aldrich

    MAK008-1KT

    Hydroxyproline Assay Kit

    1 kit

    Sigma-Aldrich

    I9278-5ML

    Insulin solution human

    5ML

    Sigma-Aldrich

    P5147-100MG

    蛋白酶 來源于灰色鏈霉菌

    100mg

    Sigma-Aldrich

    661740-1G

    (乙烯基膦酸)

    1G

    Sigma-Aldrich


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