【Abcam實驗支持】如何確定 ELISA 檢測范圍？

ELISA 的動態范圍是指試劑盒能夠準確測定的抗原濃度范圍。 

閱讀下文，詳細了解如何確定動態范圍以及如何解讀不同樣本類型下的動態范圍。

如何計算動態范圍？

動態范圍可以通過繪制抗原濃度與檢測信號之間關系的標準曲線來確定。

準確且符合動態范圍的檢測必須滿足以下條件：

●標準品平行試樣之間的標準偏差較低

●抗原濃度與檢測信號之間的相關性較強

我們的 ELISA 試劑盒說明書和實驗方案通常會詳細說明實驗樣本的動態檢測范圍，該動態范圍已經通過檢測進行準確測定。 這些動態范圍通常有兩種表示方式：被測蛋白的濃度或稀釋度（后者更常見于血漿或血清等樣本）。

當動態范圍以濃度表示時，該如何解釋？

Abcam 的人 Frataxin ELISA 試劑盒 (ab176112) 的實驗方案包含一份表格，其中列出了預計位于動態范圍內的各種細胞系裂解物的總蛋白濃度范圍。 測試時，這些濃度都在標準曲線的線性范圍內。

對于 HeLa 細胞裂解液：

●在動態范圍的下限，ELISA 可以準確檢測的總共濟蛋白濃度為 0.5 µg/mL

●在動態范圍的上限，ELISA 可以準確檢測的總共濟蛋白濃度為 100 µg/mL

●因此，動態范圍表示為 0.5 – 100 µg/mL

當動態范圍以稀釋度或百分比表示時，該如何確定檢測范圍？

其他樣本類型（如血清和血漿）的濃度動態范圍通常以稀釋度（分數或百分比）表示。

以 Abcam 腫瘤壞死因子 (TNF) α ELISA 試劑盒為例 (ab208348)。 該試劑盒實驗方案中包含一份檢測范圍內血漿樣本的稀釋倍數推薦表。

對于肝素血漿：

在動態范圍的下限，ELISA 試劑盒可以準確檢測稀釋度為 1/16（6.25/100，或 6.25%）的蛋白質。

在動態范圍的上限，ELISA 試劑盒可以準確檢測未稀釋血漿中的蛋白質（100/100 =1，或 100%）

因此，動態范圍表示為 6.25 – 100%

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